Администрация гарантирует обеспечение сохранности авторской или согласованной с авторами версии опубликованных в каталоге и на сайте материалов

Каталог A

Авторство и подтверждение авторских прав - регистрация идей, концепций, теорий, гипотез.

(A1B) Естественные науки

Регистрационный №:
А023 (метод/методика)
Дата:
16.01.2008
Автор(ы):
Мосин Олег Викторович
Заявитель (и) на право собственности:
Мосин Олег Викторович
Название:
МЕТОД ОЦЕНКИ УРОВНЯ ВКЛЮЧЕНИЯ ДЕЙТЕРИЯ D И УГЛЕРОДА С13 В МОЛЕКУЛЫ МУЛЬТИКОМПОНЕНТНЫХ СМЕСЕЙ АМИНОКИСЛОТ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ОБЪЕКТОВ
© Мосин Олег Викторович, 2008

МЕТОД ОЦЕНКИ УРОВНЯ ВКЛЮЧЕНИЯ ДЕЙТЕРИЯ D И УГЛЕРОДА С13 В МОЛЕКУЛЫ МУЛЬТИКОМПОНЕНТНЫХ СМЕСЕЙ АМИНОКИСЛОТ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ОБЪЕКТОВ

Предложено использовать метод высокочувствительной масс-спектрометрии электронного удара летучих производных аминокислот для оценки уровня включения стабильных изотопов дейтерия D и углерода 13С в молекулы мультикомпонентных смесей секретируемых аминокислот L-фенилаланинпродуцирующего штамма Brevibacterium methylicum и L-лейцинпродуцирующего штамма Methylobacillus flagellatum и аминокислотные остатки суммарных белков биомассы при выращивании бактерий на средах, содержащих в качестве источников стабильных изотопов (D)метанол, (13С)метанол и тяжёлую воду. Метод также апробирован для исследования включения L-[2,3,4,5,6-D]фенилаланина, L-[3,5-D]тирозина и L-[2,4,5,6,7-D]триптофана в мембранный белок бактериородопсин, синтезируемый Halobacterium halobium ЕТ 1001. Предложенный метод заключается в прямой обработке мультикомпонентных смесей аминокислот в составе лиофилизованных культуральных жидкостей и белковых ги! дролизатов (гидролиз в 6 М DСl (3% фенол) и 2 М гидроокиси бария) N-диметиламинонафталин-5-сульфонил-хлоридом (дансилхлоридом) (и N-бензилоксикарбонил-хлоридом) и диазометаном в метиловые эфиры N-диметиламинонафталин-5-сульфонил (дансил)- и N-бензилоксикарбонил- производных аминокислот, которые препаративно разделеляли методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Основным достоинством метода является простота и удобство.
© 2008 О.В. Мосин

Регистрационный №:
А022 (способ)
Дата:
26.12.2007
Автор(ы):
Мосин Олег Викторович
Заявитель (и) на право собственности:
Мосин Олег Викторович
Название:
Способ получения дейтерированного пуринового рибонуклеозида инозина (выход 3.9 г c 1 л ростовой среды) высокого уровня дейтерированности
© Мосин Олег Викторович, 2007

Способ получения дейтерированного пуринового рибонуклеозида инозина (выход 3.9 г c 1 л ростовой среды) высокого уровня дейтерированности

Получение  дейтерированного пуринового рибонуклеозида инозина (выход 3.9 г c 1 л ростовой среды)  высокого уровня дейтерированности (61 % атомов водорода в молекуле замещены на дейтерий). Метод заключается в выращивании адаптированного к дейтерию штамма Bacillus subtilis – продуцента инозина в тяжеловодородной среде  с 2%-ным гидролизатом биомассы метилотрофной бактерии Brevibacterium methylicum как источника дейтерий-меченых ростовых субстратов (условия получения гидролизата: автоклавирование дейтеро-биомассы в 0.1 н. DСl 30-40 мин при 08 ати). Условия получения дейтерированного инозина: синтетическая тяжеловодородная среда с 99,9%-ной тяжёлой водой (мас.%): глюкоза - 12; D-меченый гидролизат B. methylicum - 2; нитрат аммония - 2; сульфат магния - 1; карбонат кальция - 2. Выращивание бактерий проводили в колбах Эрленмейера вместимостью 500 мл (наполнение средой 100 мл) в течение 5-6 сут при 30-320С в условиях интенсивной аэрации. Изотопный состав полученного инозина: 4 ат. дейтерия, 20%; 5 ат. дейтерия, 38%; 6 атомов дейтерия, 28%; 7атомов дейтерия, 14%  с включением дейтерия в рибозный и гипоксантиновый фрагменты молекулы инозина.  
© 2007 О.В. Мосин

Регистрационный №:
А020 (способ)
Дата:
14.12.2007
Автор(ы):
Мосин Олег Викторович
Заявитель (и) на право собственности:
Мосин Олег Викторович
Название:
Способ получения ДЕЙТЕРИЙ - МЕЧЕННОГО L-ФЕНИЛАЛАНИНА, ПРОДУЦИРУЕМОГО ШТАММОМ Brevibacterium methylicum ДЛЯ МЕДИЦИНСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
© Мосин Олег Викторович, 2007

Способ получения ДЕЙТЕРИЙ - МЕЧЕННОГО L-ФЕНИЛАЛАНИНА, ПРОДУЦИРУЕМОГО ШТАММОМ Brevibacterium methylicum ДЛЯ МЕДИЦИНСКОЙ ДИАГНОСТИКИ

Способ биосинтеза   [2H6] - L-фенилаланина штаммом факультативных метилотрофных бактерий Brevibacterium methylicum, способного ассимилировать метанол (или его дейтерий-меченный аналог) в качестве источника углерода и энергии. Биосинтез проводили на минимальной среде, содержащей 98 об.% тяжёлой воды и 2% дейтеро-метанол. Выход L-фенилаланина при этом составил 1 г/л. Анализ степени дейтерированности L-фенилаланина проводили методом масс-спектрометрии электронного удара после препаративного разделения методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в виде метилового эфира дансил - фенилаланина и карбобензокси-фенилаланина. Согласно полученным данным, степень изотопного включения дейтерия в фенилаланин составила 75 % (6 атомов водорода в молекуле замещены на дейтерий), что свидетельствует о высокой эффективности мечения L-фенилаланина в этих условиях. Полученный [D6]- фенилаланин може! 
т быть использован для диагностики наследственной фенилкетонурии.
© 2007 О.В. Мосин

Регистрационный №:
А018 (метод/методика)
Дата:
12.12.2007
Автор(ы):
Мосин Олег Викторович
Заявитель (и) на право собственности:
Мосин Олег Викторович
Название:
МЕТОД ВКЛЮЧЕНИЯ ДЕЙТЕРИЙ-МЕЧЕННЫХ АРОМАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТ L-[2,3,4,5,6-D5]-ФЕНИЛАЛАНИНА, L-[3,5-D2]-ТИРОЗИНА И L-[2,4,5,6,7-D5]-ТРИПТОФАНА В МОЛЕКУЛУ МЕМБРАННОГО БЕЛКА БАКТЕРИОРОДОПСИНА
© Мосин Олег Викторович, 2007

МЕТОД ВКЛЮЧЕНИЯ ДЕЙТЕРИЙ-МЕЧЕННЫХ АРОМАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТ L-[2,3,4,5,6-D5]-ФЕНИЛАЛАНИНА, L-[3,5-D2]-ТИРОЗИНА И L-[2,4,5,6,7-D5]-ТРИПТОФАНА В МОЛЕКУЛУ МЕМБРАННОГО БЕЛКА БАКТЕРИОРОДОПСИНА

Метод получения мембранного белка бактериородопсина галофильной бактерией Halobacterium halobium, меченного дейтерием по остаткам [2, 3, 4, 5, 6-2H5]фенилаланина, [3, 5-2H2]тирозина и [2, 4, 5, 6, 7-2H5]триптофана и его последующее препаративное выделение с выходом 8-10 мг на 1 г бактериальной биомассы. Метод заключается в выращивании штамма галофильных бактерий Halobacterium halobium на синтетической среде с дейтеро-меченными ароматическими аминокислотами, солюбилизацию белка в 0,5%-ном ДНС-Na и низкотемпературному фракционированию метанолом с последующей экстракцией от каротиноидов, липидов, высоко- и низкомолекулярных соединений, электрофорез в 12.5% ПААГ с 0.1% ДДС-Na и гель-проникающую хроматографию на сефадексе G-200.

Включение дейтерий-ароматических аминокислот контролировали методом масс-спектрометрии электронного удара ЭУ после гидролиза белка 4 н. Ba(OH)2 и разделения обращенно-фазовой  высокоэффективной жидкостной хроматографией в виде метиловых эфиров N-Днс-производных аминокислот.
 © 2007 О.В. Мосин


Регистрационный №:
А017
Дата:
06.12.2007
Автор(ы):
Мосин Олег Викторович
Заявитель (и) на право собственности:
Мосин Олег Викторович
Название:
Метод твердофазной адаптации клеток к тяжёлой воде
© Мосин Олег Викторович, 2007

Метод твердофазной адаптации клеток к тяжёлой воде

Метод твёрдофазной адаптации клеток различных микроорганизмов, в том числе метилотрофных бактерий, бацилл и галофильных бактерий к тяжёлой воде, заключающийся в серии множественных адаптационных пассажей бактерий на чашках Петри с твёрдыми агаризованными средами при ступенчатом увеличении концентрации тяжёлой воды в них от 0 до 98% тяжёлой воды, отличающийся тем, что, с целью повышении степени адаптации этих микроорганизмов к тяжелой воде,  на чашках Петри последовательно отбираются отдельные колонии, выросшие на средах, содержащих низкие концентрации тяжёлой воды, а затем их пересевают на среды с большей степенью дейтерированности, включая среду с 98% тяжёлой водой (степень выживаемости бактерий на максимальной тяжёловодородной среде составила не более 50%).

За ходом адаптации клеток наблюдали по изменениям продолжительности лаг-фазы, времени клеточной генерации и выходов микробной биомассы, а также по максимальному уровню накопления конечных продуктов биосинтеза в культуральной жидкости.
© 2007 О.В. Мосин


Товары 101 - 105 из 105
Начало | Пред. | 7 8 9 10 11 | След. | Конец Все

Меню раздела

Актуальная информация

Интелл-Защита

От администрации

Новости